רקע: אגריטין ופעילותו האנטי-גידולית
הפטרייה אגריקוס, Agaricus blazei Murrill (ABM), נמצאה במחקרים קודמים כבעלת פוטנציאל אנטי-סרטני.
מרכיב מרכזי שנחקר בהקשר זה הוא אגריטין, תרכובת הידרזין הנמצאת בפטרייה.
מטרת המחקר הנוכחי הייתה לבחון את המנגנון המולקולרי הספציפי שבאמצעותו אגריטין משפיע על תאים סרטניים.
שיטת המחקר
החוקרים התמקדו בקו התאים U937 (תאי לוקמיה מונוציטית אנושית) וטיפלו בהם באגריטין בריכוז של 10μg/mL למשך 48 שעות.
הבדיקות כללו:
- ניתוח מורפולוגי וביוכימי: זיהוי שינויים אופייניים לאפופטוזיס (מוות תאי מתוכנת), כגון פיצול גרעיני ופיצול DNA (DNA laddering).
- ציטומטריית זרימה (FACS): מדידת ביטוי אנקסין V (סימן לאפופטוזיס מוקדם) וביטוי אנטיגן Fas (CD95).
- ניתוח מסלולי קספאזות: מדידת פעילות האנזימים קספאז-3, -8, ו-9, ובחינת שחרור ציטוכרום c מהמיטוכונדריה.
ממצאים עיקריים
- אינדוקציה של אפופטוזיס: הטיפול באגריטין גרם לפיצול גרעיני משמעותי, לפיצול DNA, ועלייה תלוית-זמן בביטוי אנקסין V, המעידים על כניסה לאפופטוזיס בתאי U937.
- הפעלת קספאזות ושחרור ציטוכרום c: נצפתה עלייה הדרגתית בפעילות של קספאז-9 וקספאז-3 לאחר הטיפול, ובמקביל זוהה שחרור של ציטוכרום c מתוך המיטוכונדריה.
זיהוי המסלול: שימוש במעכבי אנזימים הראה כי מעכבי קספאז-3 הפחיתו משמעותית את המוות התאי, בעוד שלא נצפה שינוי משמעותי בביטוי אנטיגן Fas (CD95) או בפעילות קספאז-8.
*שינויים מורפולוגיים בתאי U937: התמונות (צביעת Wright-Giemsa ו-TUNEL) מראות את פיצול הגרעין (Nuclear Fragmentation) וגופיפי המוות התאי ("גופיפי אפופטוזיס") שנוצרים לאחר טיפול באגריטין.
מסקנות המחקר
המחקר הסיק כי אגריטין גורם לאפופטוזיס בתאי לוקמיה U937. מנגנון הפעולה העיקרי מתווך באמצעות:
- המסלול המיטוכונדריאלי (פנימי): שחרור ציטוכרום c, המוביל להפעלת קספאז-9.
- קספאז-3: הפעלת האנזים המבצע (קספאז-3) כשלב סופי להריסת התא.
החוקרים מדגישים כי מדובר בדיווח ראשון המציג את המנגנון האפופטוטי כדרך הפעולה של אגריטין, דבר שיכול לסייע בפיתוח גישות טיפוליות מבוססות רכיבי פטריות.
מקור:
Akiyama, H., Endo, M., Matsui, T., Katsuda, I., Emi, N., Kawamoto, Y., Koike, T., & Beppu, H. (2011). Agaritine from Agaricus blazei Murrill induces apoptosis in the leukemic cell line U937. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)—General Subjects, 1810(5), 519–525.
